内质网滞留型抗CyclinD1胞内抗体在HeLa细胞中的表达分析
目的构建内质网滞留型的抗CyclinD1胞内抗体并鉴定其在肿瘤细胞中的表达活性。方法利用PCR技术将细胞内质网滞留信号及E-tag检测标签引入抗CyclinD1人源单链抗体,获得抗CyclinD1胞内抗体(AD5E)基因片段,通过分子克隆技术,构建重组真核表达载体pcDNA3.1-AD5E,限制性内切酶分析及DNA测序验证其序列及读码框正确后,利用脂质体介导法转染HeLa细胞,RT-PCR和间接免疫荧光实验分析该胞内抗体在肿瘤细胞中的表达活性。结果限制性内切酶分析及DNA测序发现,正确引入细胞内质网滞留信号和E-tag检测标签序列,该胞内抗体片段为876bp。RT-PCR及免疫荧光实验结果显示...
Uloženo v:
| Hlavní autoři: | , , , , , , |
|---|---|
| Médium: | Artigo |
| Jazyk: | Chinês |
| Vydáno: |
Editorial Office of Chinese Journal of Laboratory Diagnosis
2008-01-01
|
| Edice: | Zhongguo shiyan zhenduanxue |
| Témata: | |
| On-line přístup: | http://ZSZD.publish.founderss.cn/thesisDetails?columnId=88535758&Fpath=home&index=0 |
| Tagy: |
Žádné tagy, Buďte první, kdo vytvoří štítek k tomuto záznamu!
|
