BPIFC基因真核表达载体的构建
目的 构建带有FLAG标签的BPIFC基因真核表达载体,建立稳定转染BPIFC基因的HaCaT细胞系。方法 设计引物通过PCR扩增出BPIFC基因片段,利用DNA重组技术将该基因片段定向插入pcDNA3.1-flag-N真核表达载体中,并对重组质粒进行双酶切及DNA测序鉴定。验证正确的重组质粒通过PI Max线性转染的方法转染至HaCaT细胞,通过G418筛选建立BPIFC稳定转染的HaCaT细胞系,并通过RT-PCR法和Western-blot法分别测定BPIFC mRNA和蛋白的表达量。结果 双酶切和DNA测序结果表明,pcDNA3.1-BPIFC真核表达质粒构建成功。RT-PCR结果表明...
Gardado en:
| Principais autores: | , , , , , |
|---|---|
| Formato: | Artigo |
| Idioma: | Chinês |
| Publicado: |
Editorial Office of Chinese Journal of Laboratory Diagnosis
2024-01-01
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| Series: | Zhongguo shiyan zhenduanxue |
| Assuntos: | |
| Acceso en liña: | http://ZSZD.publish.founderss.cn/thesisDetails?columnId=88417458&Fpath=home&index=0 |
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