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BPIFC基因真核表达载体的构建

目的 构建带有FLAG标签的BPIFC基因真核表达载体,建立稳定转染BPIFC基因的HaCaT细胞系。方法 设计引物通过PCR扩增出BPIFC基因片段,利用DNA重组技术将该基因片段定向插入pcDNA3.1-flag-N真核表达载体中,并对重组质粒进行双酶切及DNA测序鉴定。验证正确的重组质粒通过PI Max线性转染的方法转染至HaCaT细胞,通过G418筛选建立BPIFC稳定转染的HaCaT细胞系,并通过RT-PCR法和Western-blot法分别测定BPIFC mRNA和蛋白的表达量。结果 双酶切和DNA测序结果表明,pcDNA3.1-BPIFC真核表达质粒构建成功。RT-PCR结果表明...

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Detalles Bibliográficos
Principais autores: 陆娇娇, 郑娴, 董文婿, 杨菁, 曹罗元, 富显果
Formato: Artigo
Idioma:Chinês
Publicado: Editorial Office of Chinese Journal of Laboratory Diagnosis 2024-01-01
Series:Zhongguo shiyan zhenduanxue
Assuntos:
Acceso en liña:http://ZSZD.publish.founderss.cn/thesisDetails?columnId=88417458&Fpath=home&index=0
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