人Shh基因重组过表达慢病毒载体的构建与鉴定
目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western blotting验证Shh在转染293T细胞中表达。结果转染293T细胞后荧光显微镜,24...
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| Hauptverfasser: | , , , , , , |
|---|---|
| Format: | Artigo |
| Sprache: | Chinês |
| Veröffentlicht: |
Editorial Office of Chinese Journal of Laboratory Diagnosis
2013-01-01
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| Schriftenreihe: | Zhongguo shiyan zhenduanxue |
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | http://ZSZD.publish.founderss.cn/thesisDetails?columnId=88491888&Fpath=home&index=0 |
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